ВВЕДЕНИЕ
Простатаспецифический антиген (ПСА, прекалликреин 3) - гликопротеин, синтезирующийся преимущественно в простате и секретируемый в семенную жидкость. Концентрация ПСА в семенной жидкости колеблется от 0.2 до 3 мг/мл. ПСА является протеазой и служит для разжижения семенной жидкости. Благодаря высоким концентрациям ПСА в семенной жидкости и низким концентрациям в вагинальном секрете (от 0.4-0.9 нг/мл) и прямой кишке, ПСА является хорошим маркером семенной жидкости, позволяющим определять даже незначительные количества семенной жидкости в ходе судебно-биологических экспертиз при расследованиях половых преступлений. С помощью данного теста сперма может быть обнаружена, даже если в образце отсутствуют сперматозоиды.
ПРИНЦИП РАБОТЫ ТЕСТА
Определение ПСА основано на принципе иммунохроматографии и применяется для качественного обнаружения ПСА в биологическом материале. Во время проведения анализа ПСА связывается специфическими антителами, нанесенными на тест-полоску и на поверхность окрашенных микрочастиц. В результате их взаимодействия образуется комплекс видимый в форме цветной линии.
Набор для установления наличия семенной жидкости человека дает возмо¬жность обнаружить следы ПСА с высоким уровнем точности и специфичности.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ
Чувствительность набора для установления наличия семенной жидкости человека (аналитическая чувствительность) не превышает 2 нг/мл. Это означает, что попадание всего 10 мкл спермы вызывает 200-кратное возрастание концентрации ПСА в вагинальном секрете. ПСА очень устойчив и может быть обнаружен во влагалищном мазке спустя 14 - 47 часов после коитуса. ПСА достаточно стабилен при высушивании - например, на текстильных материалах (одежде) ПСА может быть обнаружен на протяжении как минимум 2 лет. Следует помнить, что кровь, моча и другие биологические жидкости также могут содержать ПСА. Высокие концентрации ПСА наблюдаются в молочной железе при лактации и грудном молоке, поэтому данный белок нельзя считать строго специфичным для простаты. ПСА в сыворотке крови здоровых мужчин достаточно низкая (менее 4 нг/мл), но в исключительных случаях заболеваний простаты она может возрастать до 200 нг/мл. В моче здоровых мужчин содержание ПСА может достигать 800 нг/мл и более. В сомнительных случаях, при необходимости дифференциации мочи и семенной жидкости, следует произвести определение концентрации ПСА. Максимальное разведение мужской мочи, в котором может быть определён ПСА, составляет 1:200. Пробы спермы дают положительный результат на ПСА даже при раведении 1:200000, т.е. в разведении, в 1000 раз превышающем разведение мочи. Иследования показывают, что в моче мальчиков незначительные количества ПСА начинают выявляться с 11 лет. При анализе образца с очень высокой концентрацией ПСА (свыше 100 мкг/ мл) может наблюдаться ложноотрицательный результат из-за эффекта прозоны (избытка антигена). Чтобы исключить появление этого эффекта, разбавьте исследуемый образец Буфером для разведения образца в 100 раз и повторите тестирование.
СОСТАВ НАБОРА
| Наименование | Кол-во | Ед. |
| Иммунохроматографическая полоска в кассете; упакована в пакет с осушителем; готова к использованию | 40 | шт |
| Буферный раствор, 50 мл | 1 | шт |
| Инструкция по применению | 1 | шт |
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Отберите из ёмкости с буфером в отдельную чистую пробирку 0,2-1,25 мл буферного раствора. С помощью одноразовой ватной палочки соберите исследуемый материал или "вырез с одежды" и поместите его в пробирку с буферным раствором. Закройте пробирку и перемешайте содержимое в течение 20-30 секунд, поставьте на 2 минуты, после этого отберите супернатант. Для экстракции ПСА из плохо растворимых материалов, содержащих пятна семенной жидкости, материал необходимо поместить в буферную жидкость и экстрагировать при температуре +4 °C в течение двух часов, после чего отобрать буферную жидкость и центрифугировать в течение 3 минут при скорости 1500 rpm. Отобрать супернатант, использовать в качестве образца для нанесения на тест-полоску.
ВЫПОЛНЕНИЕ ТЕСТА
Для выполнения данного теста нужен простейший таймер и хорошо освещенное место. Все компоненты теста должны быть доведены до комнатной температуры (+18...+25 °C).
- Извлеките кассету с иммунохроматографической полоской из упаковки и поместите ее на сухую горизонтальную плоскость тестовой поверхностью вверх.
- С помощью одноразовой пипетки внесите 3-4 капли образца в круглое окошко S. При использовании автоматического дозатора объем внесения установите в диапазоне 100-120 мкл. При этом держите пипетку вертикально. Наконечник пипетки НЕ ДОЛЖЕН КАСАТЬСЯ ПОВЕРХНОСТИ МЕМБРАНЫ!
- Во время проведения теста не трогайте и не перемещайте кассету с иммунохроматографической полоской.
