ВВЕДЕНИЕ
Гемоглобин - сложный железосодержащий белок животных, обеспечивающий перенос кислорода в ткани. У позвоночных животных он содержится в эритроцитах, а у большинства беспозвоночных растворен в плазме крови и может присутствовать в других тканях.
При расследовании преступления может возникнуть необходимость подтверждения видовой принадлежности крови человека в образце. Для этого существуют различные методы, однако только иммунохимическое определение дает возможность выполнить эту задачу оперативно.
С помощью набора «ХЕМАтестКровь» тест можно проводить без дополнительной обработки материала прямо на месте взятия пробы.
ПРИНЦИП РАБОТЫ ТЕСТА
Набор «ХЕМАтестКровь» основан на принципе иммуно-хромато- графического анализа и применяется для качественного обнаружения антигена крови человека (гемоглобина) в биологическом материале.
Во время проведения теста антигены гемоглобина человека связывается специфическими антителами, нанесенными на тест-полоску и на поверхность окрашенных микрочастиц. В результате их взаимодействия образуется комплекс видимый в форме цветной линии.
Набор «ХЕМАтестКровь» дает возможность обнаружить следы крови человека с высоким уровнем точности и специфичности.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ ТЕСТА
Чувствительность данного теста по целевому антигену (гемоглобину) составляет около 2 нг/мл раствора. В смеси «ХЕМАтестКровь» препаратов крови определяет необработанную (сырую) кровь с чувствительностью 10 ppm (1:100 тысяч). При анализе высушенной крови чувствительность теста составляет около 20 мг сухого веса крови на 1 кг сухого веса материала (20 ppm), однако этот показатель значительно варьирует в зависимости от степени тепловой обработки материала. Длительное (до 10 лет) хранение сухого пятна крови или мышечной ткани не приводит к значительному снижению чувствительности теста.
Тест НЕ СПОСОБЕН ВЫЯВЛЯТЬ кровь человека в материале, прошедшем глубокую тепловую обработку (более 120 °С, дольше 30 минут), например, после жарки или приготовления в микроволновой печи. Жесткая химическая обработка (стирка, отбеливание, использование щелочей и пятновыводителей) также значительно снижают чувствительность определения. «ХЕМАтестКровь» также неспособен выявить следы слюны, семенной жидкости, мочи и других выделений человека, не содержащих значительных примесей сыворотки крови. Наоборот, положительный результат теста необязательно означает, что в материале содержится именно кровь человека, так как следы гемоглобина могут присутствовать и в других биологических жидкостях.
Тест нечувствителен к крови следующих видов: корова, свинья, дикий кабан, овца, лошадь, лось, олени, медведь, верблюд, курица, индейка, утка, гусь, цесарка, перепел. Значительная перекрестная реакция (ложноположительный результат) наблюдается при определении крови приматов, незначительная (менее 1%) – при выявлении крови куньих (куница, хорек, соболь).
При анализе образца с очень высокой концентрацией гемоглобина человека может наблюдаться ложноотрицательный результат из-за эффекта прозоны (избытка антигена). Чтобы исключить появление этого эффекта, разбавляйте исследуемый образец Буфером для разведения образца так, чтобы в образце исчезла характерная для гемоглобина красная окраска.
СОСТАВ НАБОРА
| Наименование | Кол-во | Ед. |
| Иммунохроматографическая полоска в кассете; упакована в пакет с осушителем; готова к использованию | 30 | шт |
| Пробирка с Буфером для разведения образца 2.5 мл; готова к использованию | 30 | шт |
| Инструкция по применению | 1 | шт |
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Образец крови с поверхности.
С помощью одноразовой ватной палочки соберите исследуемый материал и поместите его в эппендорф с 1 мл дистиллированной воды. Закройте пробирку и перемешайте содержимое в течение 5-10 секунд. Жидкость от прозрачного до светло-соломенного цвета: 30-40 мкл образца добавьте в пробирку с Буфером для разведения образца. Жидкость от соломенного до светло-красного цвета: 10-20 мкл образца добавьте в пробирку с Буфером для разведения образца.
Полученные разведения используйте в анализе. Полученные разведения можно хранить в течение 2 суток при комнатной температуре (+18...+25 °С). Для экстракции старых, труднорастворимых пятен крови следует использовать лабораторное оборудование, например, вихревой смеситель.
Образец крови с ткани:
Образец диаметром от 0.75 мм до 5.5 мм поместите в Буфер для разведения образца на 5 минут. Используйте в анализе 100 мкл надосадочной жидкости.
ВЫПОЛНЕНИЕ ТЕСТА
Для выполнения теста нужен таймер и хорошо освещенное место. Все образцы и компоненты теста должны быть доведены до комнатной температуры (+18...+25°С).
- Извлеките кассету с иммунохроматографической полоской из упаковки и поместите ее на сухую горизонтальную плоскость тестовой поверхностью вверх.
- С помощью одноразовой пипетки внесите 3-4 капли образца в круглое окошко S. При использовании автоматического дозатора объем внесения установите в диапазоне 100–120 мкл. При этом держите пипетку вертикально. Наконечник пипетки НЕ ДОЛЖЕН КАСАТЬСЯ ПОВЕРХНОСТИ МЕМБРАНЫ!
- Во время проведения теста не трогайте и не перемещайте кассету с иммунохроматографической полоской.
